Cathepsin K在人软骨细胞体外培养去分化过程中的表达研究

• 作者: 刘伟 周广东 崔磊 张艳 曹谊林 柴岗
• 来源期刊: 中华创伤骨科杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 软骨细胞 酶类 细胞培养 人
• 年，卷（期）: 2007,（7）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 658-660
• 页数: 3页
• 分类号: R3
• 字数: 2724字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1671-7600.2007.07.017

摘要

目的 通过基因芯片技术研究在体外培养的去分化人软骨细胞的基因改变,从中筛选出目标基因,并对其在各代软骨细胞中的表达进行研究.方法 取体外培养的P1代和去分化的P4代软骨细胞进行8300点基因芯片的DNA微阵矩杂交,筛选出差异最明显的基因,并通过RT-PCR和Western-blot方法检测各代软骨细胞中该基因的表达水平.结果 体外培养的P1、P4代软骨细胞间共140个基因差异表达,其中Cathepsin K基因表达差异水平最明显,P4与P1的比值平均为29.72,RT-PCR显示在596 bp的条带处,随传代次数增加逐渐增亮,半定量分析P4/P1为3.21,差异有统计学意义(P＜0.05).Western-blot检测显示在相对分子质量为40 000的蛋白条带随体外传代蛋白浓度增加,灰度分析P4/P1为3.39,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 基质降解半胱氨酸蛋白酶Cathepsin K在去分化软骨细胞中表达强烈,提示其与软骨细胞去分化过程中的基质降解有关.