抑癌基因PTEN在线粒体上的定位促进A431细胞的凋亡

• 作者: 姜学军 宋卫东 岳晓婧
• 来源期刊: 微生物学报
• 学科: 生物学
• 关键词: Mito-PTEN CoxVⅡ 腺病毒 线粒体 细胞凋亡
• 年，卷（期）: 2007,（6）
• 所属期刊栏目: 遗传学和分子生物学
• 页码范围: 968-972
• 页数: 5页
• 分类号: Q786
• 字数: 3551字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0001-6209.2007.06.005

摘要

为研究抑癌基因PTEN在线粒体上的定位对细胞凋亡的影响,构建N端融合有细胞色素C氧化酶亚基七(CoxⅦ)的PTEN腺病毒重组体(Mito-PTEN).将CoxⅦ-PTEN片段克隆至腺病毒穿梭载体pAdTrack-CMV中,PmeⅠ线性化穿梭质粒,并与腺病毒基因组载体pAdeasy-1共转化大肠杆菌菌株BJ5183,鉴定重组体,并将阳性重组体转化至大肠杆菌菌株DH5α中进行扩增;经PacⅠ酶切后的重组体通过脂质体方法转染用于腺病毒包装的细胞HEK-293A,包装重组腺病毒,收集病毒液,反复扩增,进行病毒滴度的测定;通过绿色荧光蛋白(GFP)标签检测转染及感染效率;用Mito-PTEN腺病毒感染人表皮鳞状癌细胞A431,以流式细胞分析仪检测细胞凋亡情况.成功构建了Mito-PTEN的腺病毒重组体,并进行了该重组体的病毒包装,滴度为107pfu/mL,通过免疫印迹检测目的蛋白,并发现Mito-PTEN可以促进A431细胞的凋亡.Mito-PTEN的成功构建以及它对A431细胞凋亡的促进作用为研究PTEN在线粒体上的功能以及可能的在肿瘤治疗方面的应用提供了理论依据.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	宋卫东	北京大学第一医院男科中心	102	434	11.0	16.0
2	姜学军	中国科学院微生物研究所	15	116	4.0	10.0
3	岳晓婧	中国科学院微生物研究所	1	4	1.0	1.0