VCAM-1和EGFP双基因共表达重组腺病毒的构建

• 作者: 刘耀 司英健 张曦 张诚 彭贤贵 王庆余 陈幸华 高力 高蕾
• 来源期刊: 重庆医学
• 学科: 医学
• 关键词: VCAM-1 EGFP 重组腺病毒载体 构建
• 年，卷（期）: 2007,（17）
• 所属期刊栏目: 血液专题
• 页码范围: 1699-1703
• 页数: 5页
• 分类号: R730.21
• 字数: 9279字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-8348.2007.17.006

摘要

目的 构建VCAM-1和EGFP双基因共表达重组腺病毒载体.方法 采用DNA重组技术,将目的 基因VCAM-1克隆至含有报告基因EGFP的穿梭质粒;在BJ5183细胞中与pAdeasy-l质粒进行同源重组,产生重组腺病毒载体.结果 (1)VCAM-1基因与pAdTrack-CMV载体成功连接,经NotⅠ/XhoⅠ双酶切后电泳可见2个大小约为9kb和2kb左右条带,经PCR法扩增后电泳可见一个600bp左右条带,证明pAdTrack-CMV-VCAM-1重组质粒构建成功;(2)pAdTrack-CMV-VCAM-1质粒与pAdeasy-l质粒同源重组后,产物经PacⅠ酶切后电泳可观察到2个大小约为31kb和4kb左右条带,与预期结果相符.结论 Ad-VCAM-1-EGFP重组腺病毒载体构建成功.