人皮肤组织桥粒芯糖蛋白4片段的克隆和在寻常型天疱疮中免疫识别的初步研究

• 作者: 冉玉平 冯云 吕小岩 李薇 黎静宜
• 来源期刊: 四川大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 桥粒芯糖蛋白4天疱疮 克隆 融合蛋白 免疫识别
• 年，卷（期）: 2007,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 84-87
• 页数: 4页
• 分类号: R75
• 字数: 3779字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1672-173X.2007.01.021

摘要

目的 扩增人皮肤组织桥粒芯糖蛋白4(desmoglein 4,Dsg4)胞外区域EC1、EC2、EC3和EC4的核酸序列,为寻常型天疱疮(pemphigus vulgaris, PV)发病机制的研究提供依据.方法 根据GenBank中的Dsg4序列(登录号为AY177664)分析,通过逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法从人正常皮肤组织中抽提RNA,逆转录合成cDNA,聚合酶链反应(PCR)扩增皮肤组织桥粒芯糖蛋白4胞外区域EC1、EC2、EC3和EC4目的基因;应用基因重组技术将目的基因分别与质粒pET32a在T4 DNA连接酶作用下相连接,转化E.coli DH5α感受态细菌,用含氨苄青霉素的LB培养基平板筛选转化菌,阳性重组子DNA序列测定鉴定;重组融合蛋白经ELISA法与PV患者、正常对照组血清进行反应.结果 RT-PCR扩增产物经凝胶电泳得到均约为350 bp的4条条带;质粒载体pET32a连接的目的基因经序列测定后与在GenBank登录的Dsg4胞外区域EC1、EC2、EC3和EC4核酸序列完全一致,4个Dsg4胞外区域cDNA读码框架正确;Dsg4 EC1、EC2、EC3和EC4与患者血清反应,而不与正常对照组血清反应.结论 Dsg4胞外区域多肽片断在PV发病中可能有作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	冉玉平	四川大学华西医院皮肤性病科	188	763	12.0	18.0
2	黎静宜	四川大学华西医院皮肤性病科	23	154	6.0	12.0
3	李薇	四川大学华西医院皮肤性病科	150	363	8.0	12.0
4	吕小岩	四川大学华西医院皮肤性病科	15	79	4.0	8.0