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目的:研究吲哚-3-原醇(13C)对肝星状细胞(HSC)凋亡及细胞周期的影响及其机制。方法:培养永生化肝星状细胞株HSC-T6,不同浓度13C(25、50、100μmol/L)处理细胞48h后,四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测细胞存活率;碘化丙啶(PI)染色测细胞周期;FITC-AnnexinV/PI荧光染色,流式细胞术观测细胞凋亡;荧光实时定量PCR法检测细胞凋亡相关蛋白FasL、bax、bcl-2、caspase-3及细胞周期调节蛋白CyclinD1、CDK4的mRNA表达;Western blot方法检测细胞磷酸化及非磷酸化p38信号分子的表达。结果:①MTT法显示,100mol/L及以下浓度的13C处理HSC-T6后,细胞的存活率在90%以上;②凋亡分析显示,对照组细胞没有发生凋亡,25~100mol/L13C组细胞的凋亡率分别为37.6%、64.2%和79.4%;③细胞周期结果显示,对照组细胞的S期为(58.7±4.7)%,25~100mol/L 13C使细胞的S期分别降低到(34.0±3.0)%、(26.3±3.3)%及(24.9±5.3)%,而G0/G1期细胞从(31.8±3.4)%(OM)升高到(54.6±3.0)%(100M),差异有显著性(P〈0.01);④13C能剂量依赖性升高细胞Bax/Bcl-2及caspase-3的mRNA水平(P〈0.05),对Fas的mRNA表达无影响。同时能降低Cyclin D1和CDK4的mRNA水平(P〈0.05);⑤13C能减少细胞内p38的磷酸化水平,呈剂量依赖性,对非磷酸化p38无影响。结论:13C可诱导体外活化的HSC凋亡,其机制与阻滞细胞周期进展、抑制p38信号途径及增加凋亡相关诱导因子的表达有关。
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文献信息
篇名 吲哚-3-原醇对肝星状细胞凋亡及细胞周期的影响
来源期刊 中国药理通讯 学科 医学
关键词 吲哚-3-原醇 肝星状细胞 信使核糖核酸水平 四甲基偶氮唑盐法
年,卷(期) 2007,(3) 所属期刊栏目
研究方向 页码范围 48-49
页数 2页 分类号 R-33
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序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 汪晖 武汉大学基础医学院药理学系 232 1542 21.0 27.0
2 平洁 武汉大学基础医学院药理学系 29 196 8.0 13.0
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吲哚-3-原醇
肝星状细胞
信使核糖核酸水平
四甲基偶氮唑盐法
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