iRNA抑制人黑素瘤M14细胞生存素的表达

• 作者: 孙建方 宋琳毅 曾学思
• 来源期刊: 中华皮肤科杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 生存素 RNA,小分子干扰 质粒 黑色素瘤
• 年，卷（期）: 2007,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 86-88
• 页数: 3页
• 分类号: R73
• 字数: 2457字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/j.issn:0412-4030.2007.02.007

摘要

目的 通过构建生存素(survivin)的小干扰RNA(siRNA)表达质粒,研究其对人黑素瘤M14细胞生存素表达的抑制作用,为后续研究奠定基础.方法 设计有小发夹结构的生存素siRNA对应模板DNA序列,克隆至pRNAT-H1.1/neo质粒,构建重组质粒pRNAT-H1.1/neo-survivin,转染人黑素瘤M14细胞,采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、蛋白质印迹检测生存素表达.结果 酶切及测序结果证实重组质粒pRNAT-H1.1/neo-survivin构建成功.将重组质粒及空载体(阴性对照)转染M14细胞48 h后,siRNA处理组M14细胞生存素表达较空白对照组显著下降,表达抑制率在mRNA和蛋白水平分别为62.3%±1.5%和53.6%±0.9%.结论 生存素siRNA表达质粒pRNAT-H1.1/neo-survivin可抑制人黑素瘤M14细胞生存素的表达.