PCR反向线点杂交鉴定常见念珠菌的研究

• 作者: 向华国 周华 涂植光 熊礼宽 苏放明
• 来源期刊: 中华皮肤科杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 核酸杂交 念珠菌属 寡核苷核探针 聚合酶链反应
• 年，卷（期）: 2007,（8）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 485-488
• 页数: 4页
• 分类号: R3
• 字数: 3239字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/j.issn:0412-4030.2007.08.011

摘要

目的 建立PCR反向线点杂交技术(PCR-RLB)快速检测和鉴定常见念珠菌的方法.方法 以念珠菌属间隔序列Ⅱ(ITS2)为靶基因设计通用引物,用生物素标记反义引物,PCR扩增白念珠菌、热带念珠菌、克柔念珠菌、光滑念球菌、近平滑念珠菌、都柏林念珠菌DNA,然后与通过氨基标记固定在尼龙膜上的各特异性寡核苷酸探针杂交,并进行临床标本和分离株的检测.结果 念珠菌标准菌株可扩增出302～441 bp DNA片段,6种特异性寡核苷酸探针可分别与相应念珠菌PCR产物杂交,其敏感性为10 cfu/mL.通过对100例分离株的检测,然后与培养法鉴定(Merieux Vitek)的结果比较,有97株与培养结果一致,另外3株通过DNA测序结果证实与PCR-RLB测定结果一致.通过对200例女性阴道拭子进行检测,PCR-RLB阳性率为49%,而涂片法和培养法阳性率分别为27%和39%,明显高于涂片法和培养法(P＜0.05).结论 该方法可快速、敏感、准确鉴定临床上常见的念珠菌.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	周华		65	532	14.0	19.0
2	涂植光	重庆医科大学医学检验系	172	1533	19.0	32.0
3	苏放明	深圳市人民医院妇科	26	188	8.0	13.0
4	熊礼宽		38	198	9.0	12.0
5	向华国		18	62	5.0	6.0