一种新的等温单向生长基因合成法初步探索

• 作者: 张晓东 曹雪雁 林继伟 胡钧
• 来源期刊: 遗传
• 学科: 生物学
• 关键词: 基因合成 等温 单向 发夹结构
• 年，卷（期）: 2007,（6）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 765-770
• 页数: 6页
• 分类号: Q3
• 字数: 4694字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0253-9772.2007.06.018

摘要

基因合成正日益成为基因获取的一种有效手段.两种常用的基因合成方法是基于PCR的基因合成(P法)和基于连接酶的基因合成(L法).这两种方法都不是独立于所合成基因的序列内容的.文章首次提出了一种新的基因合成策略-等温单向生长法(Isothermal Unidirectional Elongation Method,IUEM),在3种酶的作用下,DNA链在等温状态下单向串行延伸,直到获得目标基因.由于引物设计成特殊的发夹结构,该方法可以做到合成过程独立于或部分独立于目标基因的序列内容.本文探索了该策略的实验可行性,检测了影响基因合成的各种因素,并利用该方法成功地合成了一段254 bp和一段300 bp的DNA序列.