脂质体介导色素上皮衍生因子-绿色荧光蛋白质粒转染大鼠视网膜细胞及其转染途径的实验研究

• 作者: 何守志 张新秀 翟所强 郭维维
• 来源期刊: 中华眼科杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 脂质体 眼蛋白质类 神经生长因子 舍平类 发光蛋白质类 转染
• 年，卷（期）: 2007,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 55-58
• 页数: 4页
• 分类号: R77
• 字数: 3255字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/j:issn:0412-4081.2007.01.015

摘要

目的 观察表达质粒色素上皮衍生因子(PEDF)-绿色荧光蛋白(GFP)以脂质体介导转染入BN大鼠视网膜组织的表达及定位,探索合适的基因治疗给药方法.方法 将脂质体包裹的重组表达质粒PEDF-GFP分别经玻璃体注射和视网膜下注射的途径转染至BN大鼠眼内,于一定时间内分别用荧光显微镜观察GFP表达情况,用RT-PCR方法检测PEDF表达情况.结果 (1)BN大鼠视网膜下注射脂质体包裹的重组表达质粒PEDF-GFP后1 d即可见在荧光显微镜下观察到在注射点周围明显的绿色荧光蛋白分布于视网膜全层包括RPE细胞层,第2、3周荧光强度比第1周增强,荧光范围也有所扩大,可以持续表达4周.RT-PCR结果证实PEDF mRNA表达明显较对照组增强.(2)经玻璃体腔注射脂质体包裹的重组表达质粒PEDF-GFP后第1天BN大鼠的视网膜和RPE细胞亦可见绿色荧光蛋白表达,且分布更均匀,范围更广.第1、2周表达明显增强,到第4周仍有表达.RT-PCR结果也证实PEDF mRNA表达明显较对照组增强.结论 阳离子脂质体可以成功介导PEDF-GFP基因转染至BN大鼠的视网膜组织、RPE细胞中,并能够持续表达.视网膜下注射和玻璃体腔注射均为有效的转染途径.本研究为视网膜,脉络膜新生血管性疾病的基因治疗奠定了基础.