摘要:
目的 建立套式RT-PCR检测急性下呼吸道感染(ALRTI)患儿临床样本鼻病毒(HRV)基因的方法,了解上海地区ALRTI患儿HRV感染的现状.方法 收集2005年1月至12月住院的342例确诊为ALRTI的患儿的深部鼻咽分泌物(NPS)标本.用套式RT-PCR方法检测NPS中的HRV基因,并进一步对扩增产物进行序列分析.对HRV在ALRTI患儿中所占比例、性别、年龄、季节分布及临床特点进行分析.结果 在342例ALRTI患儿的NPS标本中,套式RT-PCR检测到46例HRV阳性,占13.5%;选取15份HRV阳性样本,用另一对引物扩增并测序,测得的核苷酸序列经BLAST比较,与基因库中已知HRV序列的同源性为83%~97%;15份样本序列之间核苷酸同源性在64.4%~98.4%,核苷酸变异在1.6%~48.3%;15份样本序列在进化树中聚类为两簇;15份样本序列变异度较大,可表现为核苷酸的点突变,也可是邻近几个碱基同时突变,甚至有单个或邻近几个碱基的核苷酸缺失及插入突变.46例阳性患儿中,男33例,女13例,男女之比为2.5∶1.HRV阳性患儿中,3岁以下婴幼儿检出38例,占HRV总检出数的82.6%;1岁以下患儿检出27例,占58.7%.HRV所致ALRTI全年可见,在3~5月为最高峰.本组46例套式RT-PCR检测HRV阳性患儿中,诊断支气管肺炎45例,喘息性支气管炎1例;以中等度以下发热为主;39例患儿末梢血WBC<10×109/L,占84.8%;37例中性粒细胞<0.50,占80.4%;36例C反应蛋白<8 mg/L,占78.3%,均符合病毒性肺炎的特点.合并症较少,绝大部分病情较轻,所有患儿均治愈.结论 套式RT-PCR检测HRV基因快速、简便.HRV基因组有高度变异的特点.HRV感染在本地区小儿ALRTI中占有一定比例.HRV所致ALRTI缺乏特异性,病情相对较轻且预后较好.