反义PCDNA3.1(+)/TIMP-1真核表达载体的构建与鉴定

• 作者: 周婷 奚海林 李睿 杨军 潘泽民 郑勇
• 来源期刊: 天津医药
• 关键词: 真核细胞质 遗传载体 基因表达 质粒 寡核苷酸类,反义 逆转录聚合酶链反应
• 年，卷（期）: 2007,（5）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 366-368
• 页数: 3页
• 分类号: R4
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0253-9896.2007.05.018

摘要

目的:构建反义TIMP-1真核细胞表达质粒.方法:用Trizol Reagent抽提肝组织中总RNA,采用两对套式引物,以逆转录巢式PCR方法扩增TIMP-1目的片段,双酶切纯化PCR产物及PCDNA3.1(+)真核细胞表达质粒,再将TIMP-1反向插入PCDNA3.1(+)线性质粒,即构建成反义TIMP-1/PCDNA3.1(+)真核细胞表达质粒,经酶切、PCR及DNA测序鉴定.结果:DNA测序结果与预期目的片段序列一致.结论:反义TIMP*1/PCDNA3.1(+)真核细胞表达质粒构建成功.