甲壳素微结晶分散体系的研制:一种新的甲壳素溶解环试验

• 作者: 毕忆群 蒋建国 蒋玉燕 陈勇
• 来源期刊: 中国组织工程研究与临床康复
• 学科: 医学
• 关键词: 甲壳素微结晶分散体系 甲壳素溶解环试验 细菌 鉴定
• 年，卷（期）: 2007,（40）
• 所属期刊栏目: 研究快报
• 页码范围: 8131-8133
• 页数: 3页
• 分类号: R318
• 字数: 4345字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1673-8225.2007.40.033

摘要

目的:鉴定细菌是否分泌甲壳素酶,并分解利用甲壳素的经典方法是甲壳素缺刻试验,但其需时较长,结果不明显,为解决以上缺点,研制甲壳索微结晶分散体系,拟创造一种新的实验方法甲壳素溶解环试验,并探讨其影响因素.方法:实验于2005-04/2006-12在浙江省医学科学院医学生物工程研究所完成.①通过高温高压、超声等综合手段,制备乳白色的甲壳素微结晶分散体系,并进行透射电镜观察.②采用制备的甲壳素微结晶分散体系,制造甲壳素培养基,取副溶血弧菌和致病性大肠杆菌44815菌悬液106 cfu/mL各1μL,分别注入甲壳素培养基中,37℃培养72 h,如接种点周围出现明显的透明环,即为阳性,反之为阴性.③制备2%,1%,0.5%3种不同浓度的NaCl及相应8.0,7.0和6.0不同pH值组合的3种甲壳素培养基,分别接种副溶血弧菌菌悬液106 cfu/mL各1μL,37℃培养72 h后测量溶解环直径.④菌量和培养温度的影响:将3种浓度菌悬液(108,106和104cfu/mL)各1μL注入甲壳素培养基中,37℃培养72 h;固定菌量(2.8×106 cfu/mL)接种后,分别在40℃、37℃和25℃培养72 h,测量溶解环直径.结果:①成功制备了甲壳素微结晶分散体系,甲壳素浓度为4%.微粒粒径＜0.5 μm.②培养72 h后,接种副溶血弧菌甲壳素培基上呈现阳性反应.③在NaCl浓度为2.0%,pH为8.0环境条件下,溶解环直径最大.④在菌量108～104 cuf/mL范围内,菌量与溶解环直径大小呈正比,但最适浓度为100 cuf/mL;在37℃环境中溶解环直径最大.结论:①甲壳素溶解环试验是鉴定细菌能否分泌甲壳素酶、并分解利用甲壳索的一种直观、快速、准确的方法.②甲壳素培养基NaCl、pH值,培养温度及菌量等对甲壳素溶解环试验均有直接的影响.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈勇	浙江省医学科学院生物工程研览所	60	228	9.0	12.0
2	蒋玉燕	浙江省医学科学院生物工程研览所	17	66	4.0	7.0
3	毕忆群	浙江省医学科学院生物工程研览所	13	54	4.0	7.0
4	蒋建国	浙江省医学科学院生物工程研览所	11	24	3.0	4.0