人IL-31的克隆表达及对表皮角化细胞的影响

• 作者: 孙万邦 杜联峰 杨吉成 盛伟华 缪竞诚 谢宇锋 黄俊琼
• 来源期刊: 中国免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 人IL-31 表皮角化细胞趋化因子 趋化作用 STAT3
• 年，卷（期）: 2007,（4）
• 所属期刊栏目: 学术会议优秀论文选登
• 页码范围: 369-373
• 页数: 5页
• 分类号: R392.11
• 字数: 4494字
• 语种: 中文

摘要

目的:克隆人IL-31基因,构建真核表达载体,研究人IL-31对表皮角化细胞HaCaT的影响及其作用机制.方法:PMA、PHA刺激正常人外周血单个核细胞,提取细胞总RNA,采用RT-PCR克隆人IL-31基因,并将其克隆到真核表达载体pcDNA3.1/myc-His(-)A,进行PCR和双酶切鉴定,并进行序列测定.将重组质粒转染CHO细胞,用RT-PCR和Western blot分析rhIL-31在CHO细胞中的表达.用Ni2+树脂纯化his融合蛋白,用不同剂量rhIL-31刺激HaCaT细胞,利用Transwell穿孔板检测HaCaT细胞培养上清对外周血单个核细胞的趋化作用,荧光定量PCR检测rhIL-31对HaCaT表达趋化因子的影响,Western blot检测STAT3磷酸化.结果:成功获得全长人IL-31基因,测序正确,经双酶切、PCR和序列测定鉴定,真核表达质粒构建正确,可在CHO细胞中表达;该目的蛋白刺激人表皮角化细胞HaCaT,细胞培养上清对外周血单个核细胞有趋化作用,HaCaT细胞表达趋化因子MDC、TARC、I-309;细胞STAT3磷酸化增加.结论:IL-31作用于正常人表皮角化细胞,细胞培养上清对外周血单个核细胞有趋化作用,HaCaT细胞趋化因子表达增加,细胞STAT3磷酸化增加,提示IL-31可通过STAT3发挥作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	缪竞诚	苏州大学医学院细胞与分子生物学教研室	95	511	13.0	17.0
2	杨吉成	苏州大学医学院细胞与分子生物学教研室	164	943	16.0	20.0
3	盛伟华	苏州大学医学院细胞与分子生物学教研室	129	700	15.0	18.0
4	孙万邦	遵义医学院珠海校区免疫学教研室	102	518	12.0	17.0
5	黄俊琼	苏州大学医学院细胞与分子生物学教研室	3	25	2.0	3.0
6	谢宇锋	苏州大学医学院细胞与分子生物学教研室	51	324	11.0	15.0
7	杜联峰	遵义医学院珠海校区免疫学教研室	19	82	6.0	8.0