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摘要:
采用具有HindⅢ和EcoRⅠ单一酶切位点的pEGFP-N1超螺旋型质粒为底物,检测三丙二酸富勒烯(trimalonic acid C60,TMA C60)对DNA限制性酶切反应的作用.同时以该质粒为模板,测定TMA C60对Taq DNA聚合酶催化的聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)的影响.酶切产物与PCR扩增产物均通过琼脂糖凝胶电泳来显示.实验发现,在质粒酶切体系或PCR体系中添加TMA C60后,酶切或扩增产物的生成量均显著减少.TMA C60的作用存在浓度依赖性,对HindⅢ,EcoRⅠ两种酶切反应和PCR的半抑制浓度IC50值分别为16.3,6.0,6.0 μmol/L.两种活性氧清除剂L-抗坏血酸-2-磷酸酯镁和叠氮化钠在浓度为2~10 mmol/L时,不能拮抗TMA C60对PCR和两种酶切反应的抑制作用.但是,在PCR体系中增加Taq DNA聚合酶能够拮抗TMA C60的作用.这些结果表明,TMA C60能够抑制上述3种DNA代谢相关酶的活性,其作用可能与活性氧无关.
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文献信息
篇名 三丙二酸富勒烯对DNA限制性内切酶和Taq DNA聚合酶活性的抑制作用
来源期刊 科学通报 学科 化学
关键词 三丙二酸富勒烯 DNA限制性内切酶 Taq DNA聚合酶 活性氧 抑制
年,卷(期) 2007,(4) 所属期刊栏目 论文
研究方向 页码范围 399-403
页数 5页 分类号 O6
字数 4561字 语种 中文
DOI 10.3321/j.issn:0023-074X.2007.04.006
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 杨新林 北京理工大学生命科学与技术学院 54 668 14.0 24.0
2 陈哲 北京理工大学生命科学与技术学院 3 19 2.0 3.0
3 孟宪梅 北京理工大学生命科学与技术学院 3 19 2.0 3.0
4 李博 北京理工大学生命科学与技术学院 22 107 6.0 9.0
5 谭信 北京理工大学生命科学与技术学院 16 34 3.0 5.0
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DNA限制性内切酶
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