肝细胞核因子4α对肝肿瘤细胞功能基因表达的影响

• 作者: 尹川 岳海燕 张新 曾欣 林勇 沈健伟 王要军 谢渭芬
• 来源期刊: 中华消化杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 肝细胞核因子 肝肿瘤 基因
• 年，卷（期）: 2007,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 318-321
• 页数: 4页
• 分类号: R73
• 字数: 2942字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/j.issn:0254-1432.2007.05.009

摘要

目的 利用AdEasy系统构建共同表达人肝细胞核因子4α(HNF4α)和绿色荧光蛋白(GFP)的复制缺陷型重组腺病毒--AdHNF4α,体外感染人肝肿瘤细胞株,观察HNF4α表达上调对肝肿瘤细胞的肝细胞功能基因表达的影响.方法 通过逆转录(RT)-PCR方法获取目的基因HNF4αcDNA片段,利用腺病毒载体AdEasy系统构建腺病毒质粒pAdHNF4α,经293细胞包装后得到复制缺陷型重组腺病毒AdHNF4α;将AdHNF4a体外感染人肝肿瘤细胞株HepG2和Hep3B,通过RT-PCR、Western印迹法检测HNF4α在上述细胞中的表达;同时观察外源导入HNF4a对肝肿瘤细胞的肝细胞功能基因表达的影响.结果 连接、重组后通过酶切和测序法筛选出病毒质粒pAdHNF4α;经293细胞包装,4 d后观察到GFP明显表达,反复扩增最终获得约1×1010 efu/ml滴度的重组腺病毒AdHNF4α;AdHNF4α体外感染人肝肿瘤细胞72h后,有约90%以上的细胞表达GFP,HNF4α mRNA表达明显上调,蛋白表达分别增加3.4倍(HepG2)和5.2倍(Hep3B);同时肝细胞相关功能基因包括载脂蛋白、细胞色素P450家族、谷氨酰胺合成酶、磷酸烯醇丙酮酸羧激酶及葡萄糖-6-磷酸酶mRNA表达均明显上调,且肿瘤细胞凋亡率也明显增加.结论 利用重组腺病毒载体可将外源HNF4α基因导入肝肿瘤细胞并维持高效表达,同时正常肝细胞重要功能基因表达亦增强,肿瘤细胞生物学特性明显改善,这将为基因修饰移植肝细胞研究提供新思路.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	谢渭芬	上海长征医院消化科	42	179	7.0	12.0
2	曾欣	上海长征医院消化科	13	81	5.0	8.0
3	张新		11	190	5.0	11.0
4	尹川	上海长征医院消化科	3	1	1.0	1.0
5	林勇	上海长征医院消化科	7	31	3.0	5.0
6	沈健伟	上海长征医院消化科	1	1	1.0	1.0
7	王要军	上海长征医院消化科	2	5	1.0	2.0
8	岳海燕	上海长征医院消化科	1	1	1.0	1.0