重组hEGF-TCS融合蛋白基因表达载体的构建及表达产物的纯化

• 作者: 李咏梅 杨海文 罗仁 陈金龙
• 来源期刊: 广东医学
• 学科: 医学
• 关键词: 表皮生长因子 天花粉蛋白 融合蛋白 构建 纯化
• 年，卷（期）: 2007,（6）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 882-884
• 页数: 3页
• 分类号: R3
• 字数: 2698字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-9448.2007.06.013

摘要

目的 构建新型人表皮生长因子(human epidermal growth factor,hEGF)和天花粉蛋白(trichosanthin,TCS)融合蛋白的表达载体,在大肠杆菌中表达并纯化EGF-TCS融合蛋白.方法 利用基因工程技术将人表皮生长因子EGF和天花粉蛋白基因连接起来,克隆到高效表达载体pQE30中,构建重组表达质粒pQE30-EGF-TCS.并在大肠杆菌M15中表达该融合蛋白(EGF-TCS).产物经Ni-NTA Agrose亲和层析柱纯化.结果 重组表达质粒pQE30-EGF-TCS在大肠杆菌M15中获得稳定、高效的融合表达.目的蛋白占细胞总蛋白的40%左右,以可溶性形式存在,表达上清柱纯化纯度达95%以上.结论 应用基因工程技术,成功构建了融合蛋白EGF-TCS,为进一步研究其结构功能关系和临床应用奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	罗仁	南方医科大学南方医院中医科	178	2253	25.0	39.0
2	杨海文	南方医科大学南方医院中医科	18	62	5.0	6.0
3	陈金龙	军事医学科学院放射医学研究所	21	106	5.0	9.0
4	李咏梅	南方医科大学南方医院中医科	9	30	4.0	5.0