三维立体培养法诱导去分化软骨细胞Ⅱ型胶原的重新表达

• 作者: 何清义 李强 罗飞 许建中
• 来源期刊: 中华实验外科杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 软骨细胞 诱导 表型
• 年，卷（期）: 2007,（3）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 307-309
• 页数: 3页
• 分类号: R3
• 字数: 3539字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/j.issn:1001-9030.2007.03.018

摘要

目的 用藻酸盐三维立体培养法及离心管聚集体诱导培养法促进去分化的永生化软骨细胞第50代(IHACs50)重新表达软骨细胞的Ⅱ型胶原标志性表型.方法 利用藻酸盐三维立体培养法以及离心管聚集体诱导培养法分别诱导培养去分化的永生化人关节软骨细胞第50代,然后用Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型胶原的免疫组织化学染色、Ⅱ型胶原的逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测、激光共聚焦显微镜检测、胶原定量检测该永生化软骨细胞的Ⅱ型胶原表型表达情况.结果 免疫组织化学染色、激光共聚焦显微镜检测、RT-PCR检测分别提示藻酸盐三维立体培养法和离心管聚集体诱导培养法使去分化永生化人关节软骨细胞的Ⅱ型胶原染色阳性以及621 bp的Ⅱ型胶原mRNA表达,Western blot和3H-脯氨酸标记SDS-PAGEⅡ型胶原定量检测发现前者促进Ⅱ型胶原分泌较后者多.结论 去分化永生化人关节软骨细胞可以经不同的诱导方法而重新表达Ⅱ型胶原表型,藻酸盐三维立体培养法因与软骨细胞的生理环境相似,故促进Ⅱ型胶原重新表达较多.