重组羧肽酶B及其包涵体溶解性的研究

• 作者: 安宇 李素霞 李节 范立强 袁勤生 赵健
• 来源期刊: 食品与药品A
• 学科: 生物学
• 关键词: 重组羧肽酶B 包涵体 变性 还原变性
• 年，卷（期）: 2007,（10）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1-5
• 页数: 5页
• 分类号: Q556
• 字数: 3437字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1672-979X.2007.10.001

摘要

目的 构建重组羧肽酶B(rCPB)的表达质粒和表达菌株,表达羧肽酶B(CPB),并对表达CPB包涵体的溶解性进行研究.方法 构建CPB重组质粒pET-21a-CPB,将其导入表达菌株BL21(DE3)中,分别在25℃和37℃进行诱导表达;所得包涵体分别用不同浓度尿素添加不同还原剂溶解,以溶液中的蛋白质浓度判定其溶解性,利用非还原SDS-PAGE分析其溶解性提高的原因.结果 诱导后生长温度不同对rCPB包涵体的纯度及后期处理均有影响;rCPB包涵体在10 mol/L尿素溶液中的溶解度比在8 mol/L尿素溶液中提高2～3倍;添加0.75%β-巯基乙醇能显著改善rCPB包涵体的溶解效果.经非还原SDS-PAGE分析,添加β-巯基乙醇后,溶解rCPB聚体的含量减少.结论 成功地表达了rCPB,并通过实验提高了rCPB包涵体的溶解度.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	袁勤生	华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室	151	1535	22.0	29.0
2	赵健	华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室	58	146	4.0	9.0
3	李素霞	华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室	54	259	9.0	14.0
4	范立强	华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室	37	149	7.0	11.0
5	安宇	华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室	1	2	1.0	1.0
6	李节	华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室	1	2	1.0	1.0