应用亲和磷酸蛋白质组学筛选氧化应激重塑型LPS通路的侯选信号分子

• 作者: 刘炜 姜勇 朱振宇 李煜生 潘婷 邹志鹏
• 来源期刊: 中国病理生理杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 脂多糖类 电泳 氧化性应激 磷酸化蛋白质组学
• 年，卷（期）: 2007,（6）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1189-1194
• 页数: 6页
• 分类号: Q257|R363.2+1
• 字数: 4117字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-4718.2007.06.035

摘要

目的:研究低剂量LPS刺激的Thp-1细胞在有或无H2O2预处理时磷酸化蛋白组的差异,以初步筛选氧化应激重塑型LPS通路中的新信号分子.方法:使用PMA刺激Thp-1单核细胞36 h使之分化成为成熟的巨噬细胞,静息36 h后,先以等体积的培养基或100 μmol/L H2O2刺激1 h,再以培养基或10 μg/L LPS刺激 30 min.采用PMAC ( phosphoprotein metal affinity column)富集各组细胞的磷酸化蛋白质,经超滤除盐后进行二维凝胶电泳,比较LPS组和H2O2+LPS组的磷酸化蛋白图谱的差异,并挑选部分斑点进行质谱鉴定.结果:相对于LPS组(仅用LPS刺激的细胞),在H2O2+LPS组(LPS刺激前经H2O2提前处理的细胞)中,有29个磷酸化蛋白斑点在双向电泳图谱中表现出可重复的差异,其中,17个斑点发生了上调(包括新出现的斑点),12个发生了下调(包括消失的斑点).我们已经鉴定出其中5个差异蛋白,这些蛋白参与多种多样的细胞过程例如蛋白质降解、信号转导和蛋白质折叠等.其中,在H2O2+LPS组中显著下调的proteasome beta-4亚基与LPS信号传递关系密切.结论:亲和磷酸蛋白组学有效减少了高丰度的结构蛋白的干扰并增加了信号分子检出的可能性.上述5个蛋白尤其是proteasome beta-4亚基可能是氧化应激重塑型LPS通路的重要调节分子.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李煜生	南方医科大学病理生理教研室	11	27	3.0	4.0
2	姜勇	南方医科大学病理生理教研室	72	377	8.0	17.0
3	刘炜	中山大学中山医学院蛋白质组学实验室	24	154	7.0	11.0
4	朱振宇	中山大学中山医学院生化与分子生物学教研室	51	397	8.0	18.0
5	邹志鹏	南方医科大学细胞生物教研室	13	18	3.0	4.0
6	潘婷	南方医科大学细胞生物教研室	5	23	2.0	4.0