重症肌无力胸腺组织蛋白质组双向电泳方法的建立

• 作者: 崔新征 张清勇 杜英 杨继要 郭亮 高峰
• 来源期刊: 郑州大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 重症肌无力 胸腺 蛋白质组 双向电泳
• 年，卷（期）: 2007,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 22-26
• 页数: 5页
• 分类号: R74
• 字数: 3969字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-6825.2007.01.009

摘要

目的:建立和优化重症肌无力(MG)胸腺组织蛋白质组双向电泳技术方法.方法:提取MG患者(n=3)增生型胸腺组织蛋白,以固相pH梯度胶条做第一向等电聚焦电泳,SDS聚丙烯酰胺凝胶垂直电泳为第二向.在以上过程中分别对蛋白提取、等电聚焦程序(A、B、C、D)和凝胶染色方法等各个实验环节进行控制和优化,利用PDQuest 7.1.1软件分析获得的二维凝胶图像.结果:①采用一步法提取胸腺组织蛋白质,第一向等电聚焦采用7cm IPG胶条,聚焦程序选择B,硝酸银染色.3例标本重复4次,共获12幅二维凝胶图像.随机选取1例标本的2幅图像,利用软件对2幅中的蛋白点进行匹配,匹配率为82.1%;3份样品共12幅凝胶图像的对比,获得3个共同存在的标志蛋白点,相对分子质量和等电点分别为:A点(82 700,7.0)、B点(50 700,5.76)和C点(33 300,5.02).②进一步优化上述实验条件,选择1例标本,采用两步法提取胸腺组织蛋白质,选用17 cm IPG胶条,聚焦采用程序D,考马斯亮蓝染色,获得的二维凝胶图像与一步法(其他条件相同)比较.一步法可检测到蛋白质点326个,两步法可检测到562个蛋白点.结论:①建立了MG胸腺组织蛋白质组提取的方法.采用两步法可以更有效地提取胸腺组织蛋白质组.②利用优化后的实验方法,获得了MG胸腺组织蛋白二维凝胶图像,为开展MG胸腺组织蛋白质组学研究打下了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	高峰	郑州大学河南省医学科学研究所	52	384	11.0	17.0
2	崔新征	郑州大学第二附属医院普胸外科	47	167	7.0	9.0
6	杜英	郑州大学基础医学院微生物学与免疫学教研室	115	406	10.0	13.0
7	杨继要	郑州大学基础医学院组织学与胚胎学教研室	38	138	7.0	9.0
8	郭亮	郑州大学第二附属医院普胸外科	14	25	4.0	4.0