绿色荧光蛋白标记的人脂联素真核表达载体的构建

• 作者: 刘德敏 孙颖 张捷 杜春红
• 来源期刊: 天津医药
• 关键词: 脂类 遗传载体 质粒 绿色荧光蛋白质类 聚合酶链反应
• 年，卷（期）: 2007,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 324-325,C2
• 页数: 3页
• 分类号: R3
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0253-9896.2007.05.002

摘要

目的:构建绿色荧光蛋白(GFP)标记的人脂联素(Adiponectin)真核表达质粒.方法:用本实验室已构建好的人脂联素克隆载体pMD18-T/Adiponectin为模板,结合已设计好的特异性引物,采用PCR方法克隆出Adiponectin目的片段,将该目的片段再连至真核表达载体pcDNA3.1/CT-GFP-TOPO上,转化入TOP10感受态细胞中,通过筛选得到融合有绿色荧光蛋白的重组质粒pcDNA3.1/CT-GFP-TOPO-Adiponectin.结果:PCR获得长度为736 bp的目的片段,经pcDNA3.1/CT-GFP-TOPO真核表达载体连接、筛选及序列分析后,证实所插入的目的片段与gene bank检索的人脂联素cDNA序列(Accession NM-004797)100%匹配.结论:绿色荧光蛋白标记的人脂联素真核表达载体构建成功.