人NDRG2启动子的克隆与活性鉴定

• 作者: 于江天 刘新平 张健 苏金 药立波 陈苏宁
• 来源期刊: 生物技术通讯
• 学科: 生物学
• 关键词: NDRG2 启动子 转录调控
• 年，卷（期）: 2007,（1）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 9-11
• 页数: 3页
• 分类号: Q785
• 字数: 2038字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-0002.2007.01.003

摘要

目的:克隆人NDRG2的启动子,并进行启动子的活性鉴定.方法:用Advantage-GC Taq酶,采用PCR方法,以BCA克隆R-998D1为模板,克隆人NDRG2(-1455/+274)的启动子.分别构建NDRG2(-1131/+274)、NDRG2(-273/+274)、NDRG2(-135/+274)、NDRG2(-79/+274)和NDRG2(-79/+57)等不同长度的截短体,并分别亚克隆入pGL3-basic报告基因载体,测序鉴定.分别转染HEK293和HeLa细胞后,运用双荧光报告基因系统进行启动子活性分析,从而判断核心启动子的位置.结果:人NDRG2的启动子克隆成功,并构建了不同长度的截短体,DNA测序结果与报道一致.报告基因分析结果将人NDRG2启动子的核心区域定位于NDRG2(-79/+57).结论:随着人NDRG2的启动子的长度逐渐被截短,启动子的基础活性也逐渐降低,可将人NDRG2启动子的核心区域定位于NDRG2(-79/+57).