抗克伦特罗单链抗体可溶性表达及特性鉴定

• 作者: 孙远明 张宏斌 杨金易 武婕 潘科 王弘 王捷 雷红涛
• 来源期刊: 食品科学
• 学科: 生物学
• 关键词: 克伦特罗 单链抗体 可溶性表达
• 年，卷（期）: 2007,（12）
• 所属期刊栏目: 生物工程
• 页码范围: 332-335
• 页数: 4页
• 分类号: Q78
• 字数: 2908字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1002-6630.2007.12.079

摘要

目的:表达抗克伦特罗(CBL)可溶性单链抗体(scFv)并进行抗原结合活性鉴定.方法:利用呈现scFv的重组噬菌体感染大肠杆菌HB2151,IPTG诱导可溶性scFv表达.渗透休克法提取菌体细胞周质腔中scFv.经SDS-PAGE、Western-Blotting以及间接ELISA法分析检测可溶性scFv的表达,并采用间接竞争ELISA法鉴定scFv的抗原结合活性.结果:细菌培养上清及周质腔中均有抗CBL可溶性scFv表达,其分子量约为29kD;上清液及周质腔中scFv效价分别为1:80,1:1600,能够被CBL竞争性抑制,IC50分别为0.78、0.95ng/ml.结论:可溶性抗CBL scFv在大肠杆菌HB2151中获得成功表达,表达的scFv与CBL具有很好的结合活性,可用于进一步建立CBL相应的免疫学检测方法.