Survivin特异性siRNA促进骨肉瘤细胞凋亡的实验研究

• 作者: 周勇 张勇 张明华 李存孝 杨彤涛 范清宇 马保安 黄立军
• 来源期刊: 中国现代医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 骨肉瘤 survivin RNA 干涉
• 年，卷（期）: 2007,（11）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1334-1337,1340
• 页数: 5页
• 分类号: R730.23
• 字数: 3778字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-8982.2007.11.014

摘要

目的 构建人survivin基因的siRNA真核表达载体,探讨其对骨肉瘤细胞MG63凋亡的影响.方法 应用pSilencer 3.0-H1 neo,构建survivin特异性的RNA干涉载体,转染MG63细胞,G418筛选稳定转染的细胞系.western blot分别检测survivin的蛋白的水平变化.透射电镜等形态学观察、Annexin V法、Hoechst染色检测细胞凋亡.结果 成功构建了survivin基因shRNA真核表达载体PsiS.获得了稳定转染的细胞系.与正常MG63细胞、阴性对照细胞相比,MG63/PsiS生长曲线则十分平缓,存在差异显著(P＜0.01).western blot显示MG63/PsiS细胞中蛋白表达减少.MG63/PsiS凋亡率增加(P＜0.01).结论 特异性siRNA能够明显抑制survivin基因在MG63细胞中的表达并明显促进细胞凋亡,这为进一步研究survivn在MG63细胞中的生物学功能和作用机制奠定了实验基础.