摘要:
目的:细胞外调节激酶通路在凋亡信号转导中具有重要作用,观察细胞外调节激酶信号转导通路在颅脑损伤中的作用.方法:实验于2004-09/2006-01在华北煤炭医学院中心实验室完成.选用SD大鼠70只,按随机数字表法分为2组,即对照组(n=28)和模型组(n=42),每组又分为伤后10 min,30 min,3 h,6 h,24 h,48 h和72 h 7个时相点,对照组每个时相点4只大鼠,模型组每个时相点6只大鼠.按照Mamarou方法建立大鼠重型弥漫性颅脑损伤模型,在不同时相点采用免疫组化、Western-blot法分别检测两组大鼠颅脑损伤后皮质细胞外调节激酶的表达情况,另外分别应用原位杂交方法、原位末端标记法检测半胱氨酸天冬氨酸酶3及凋亡细胞,并进行比较.结果:70只大鼠全部进入结果分析,无脱失.①模型组大鼠皮质p-细胞外调节激酶1/2蛋白在伤后10 min时已较对照组明显升高(P<0.05),逐渐增强,伤后6 h达高峰,24 h仍有大量表达,明显高于对照组(P<0.01),至伤后48 h降至对照组水平(P>0.05).②模型组大鼠皮质半胱氨酸天冬氨酸酶3 mRNA杂交阳性信号表达在伤后3 h开始升高,48 h达高峰,72 h仍明显高于对照组(P<0.01).③模型组大鼠皮质伤后3 h偶见原位末端标记阳性细胞,6 h开始增加,明显高于对照组(P<0.01),48 h达高峰.④p-细胞外调节激酶1/2蛋白与半胱氨酸天冬氨酸酶3 mRNA及原位末端标记阳性细胞均主要分布于损伤中心区及其周围,在分布区域上呈现很大的相似性.结论:脑损伤时p-细胞外调节激酶1/2蛋白表达呈一种过度激活状态,而且与半胱氨酸天冬氨酸酶3 mRNA及原位末端标记阳性细胞在分布区域上呈现很大的相似性,推测大鼠脑损伤后细胞外调节激酶通路的过度激活是导致神经细胞凋亡的作用途径之一.