骨髓间质干细胞在原位肝移植受体鼠体内分布及对肝功能和生存期的影响

• 作者: 张会迎 王琼 谭浩翔 高毅
• 来源期刊: 中国组织工程研究与临床康复
• 学科: 医学
• 关键词: 原位肝移植 免疫排斥反应 生存期 骨髓间质干细胞
• 年，卷（期）: 2007,（21）
• 所属期刊栏目: 研究与报告
• 页码范围: 4061-4065
• 页数: 5页
• 分类号: R617
• 字数: 6246字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1673-8225.2007.21.001

摘要

目的:观察受体SD大鼠骨髓间质干细胞在原位肝移植术后受体内的分布情况,及其对肝功能与生存期的影响.方法:实验于2005-06/2006-06在珠江医院中心实验室完成.①选取30只Wistar大鼠作为供体,30只SD大鼠作为受体,随机数字表法分为假手术组、模型对照组、细胞移植组,10对/组.②另取30只SD大鼠用于骨髓间质干细胞的获取,麻醉后处死,取股骨内骨髓,采用密度梯度离心法与贴壁法分离培养骨髓间质干细胞,3 d后全量换液,第10天传代.取第3代骨髓间质干细胞1 mL(含干细胞约1×107个),用5μmol/L羟基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺脂标记10 s,以体积分数为0.1的胎牛血清终止染色.③模型对照组、细胞移植组采用双袖套法建立Wistar→SD大鼠肝移植模型,移植后SD大鼠存活时间大于72 h为造模成功标志.假手术组单纯行腹部切开缝合术.术毕关腹前,假手术组、细胞移植组SD大鼠分别经门静脉注入骨髓间质干细胞悬液1 mL(约1×107个干细胞),模型对照组给予等量DMEM.④各组分别于术后1周、2周、1个月,荧光显微镜下观测经羟基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺脂标记的骨髓间质干细胞分布情况;取尾静脉血1 mL,检测谷丙转氨酶及总胆红素含量;免疫组化法检测肝组织免疫排斥反应.同时观测1个月内各组接受肝移植的SD大鼠的存活时间.结果:各组接受肝移植的10只SD大鼠均进入结果分析.①骨髓间质干细胞的原代培养与羟基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺脂标记结果:骨髓间质于细胞原代培养48～72 h以圆形和短梭形为主,体外分离培养扩增至第3代较为纯化,经羟基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺脂标记后细胞膜呈绿色.②肝组织骨髓间质干细胞的分布:假手术组、模型对照组术后1,2周及1个月肝组织内均未见骨髓间质干细胞分布.细胞移植组各时间点骨髓间质于细胞主要聚集在肝脏.③术后肝功能检测:与模型对照组比较,术后1周、2周、1个月细胞移植组谷丙转氨酶与总胆红素含量均显著降低(F=63.179,P＜0.01).④术后肝组织免疫排斥变化:模型对照组呈重度急性排斥反应,表现为肝细胞索状排列紊乱,汇管区大量炎性细胞浸润.细胞移植组呈轻度急性排斥反应,术后1周可见汇管区中等量单核细胞浸润,术后2周细胞浸润减少,术后1个月肝细胞索状排列整齐,小叶结构清晰,基本恢复正常.⑤术后生存时间观测:与模型对照组比较,细胞移植组植入骨髓间质干细胞后生存时间明显延长,Log-Rank检验差异有显著性意义(F=4.85,P＜0.01).结论:大鼠受体骨髓间质干细胞植入原位肝移植受体内后主要聚集于肝组织,能够较为迅速地恢复受体肝功能,减轻肝组织免疫排斥反应,并有效延长其生存期.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	高毅	南方医科大学珠江医院普外科	139	641	14.0	18.0
2	王琼	南方医科大学珠江医院普外科	16	113	6.0	10.0
3	张会迎	南方医科大学珠江医院普外科	7	29	3.0	5.0
4	谭浩翔	南方医科大学珠江医院普外科	3	23	3.0	3.0