牛结核病抗体胶体金快速检测技术的建立和应用

• 作者: 吴波 张书环 晁彦杰 曹莎 杨俊兴 谭亚娣 郭爱珍 陈焕春 陈颖钰 颜邦芬
• 来源期刊: 动物医学进展
• 学科: 农学
• 关键词: 免疫层析 牛分支杆菌 牛结核 抗体检测
• 年，卷（期）: 2007,（7）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 17-24
• 页数: 8页
• 分类号: S852.618|S854.43
• 字数: 6152字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-5038.2007.07.004

摘要

为了建立一种快速检测牛分支杆菌抗体的新方法用于诊断牛结核病,利用胶体金免疫层析技术原理,用原核诱导表达的牛分支杆菌抗原蛋白MPB83和MPB70分别作为胶体金标记抗原和检测线上的捕获抗原,制备牛结核抗体检测试纸条.结果表明,粒径为40 nm的胶体金制备的试纸条敏感性最高,胶体金最佳标记pH为6.0,MPB83抗原最适标记量为每毫升胶体金6.5 μg,MPB70抗原的最适包被浓度为3.0 mg/mL,抗MPB83蛋白IgG的最佳包被浓度为2.5 mg/mL,交叉试验证明试纸条不与牛的其他非相关疾病的阳性血清反应,具有较高的特异性.比较试验证明其敏感性显著高于韩国进口试纸条.在上述试验条件下生产了一批胶体金试纸条进行临床样品检测,并与细菌分离培养、结核菌素皮内变态反应(TST)和韩国试纸条比较.本试纸条与牛分支杆菌分离培养的符合率为85%,与TST的符合率为79.73%,与韩国试纸条的符合率为98.75%.快速检测牛结核抗体的免疫层析试纸条具有敏感、特异、简便、快速的特点,适用于对牛结核病进行普查和检疫,也可作为TST的辅助诊断方法,在牛结核病根除计划中具有良好的应用前景.