重组干扰质粒对多药抗性Acc-3细胞Bcl-2基因表达作用实验研究

• 作者: 季平 张劲松 张福军 李庆姝
• 来源期刊: 医学研究杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 重组干扰质粒 脂质体转染 基因表达 实时荧光定量 RT-PCR
• 年，卷（期）: 2007,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 37-40
• 页数: 4页
• 分类号: R3
• 字数: 3275字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-548X.2007.05.013

摘要

目的 探讨重组干扰质粒对口腔腺样囊性癌多药抗性细胞株(Acc-3/CDDP)细胞中Bcl-2基因表达的干扰效率.方法 按siRNA设计原则设计针对Bcl-2基因的Oligo DNA,体外化学合成Oligo DNA,Oligo DNA退火、连接、转化、筛选克隆,构建针对Bcl-2基因的表达重组RNA干扰质粒(psiB1、psiB2、psiB3),细胞脂质体转染多药抗性Acc-3/CDDP细胞,Realtime RT-PCR的标准曲线、扩增曲线和熔解曲线的数据收集处理,采用荧光定量RT-PCR方法检测重组干扰质粒对多药抗性Acc-3/CDDP细胞中Bcl-2基因表达的干扰效率.结果 实时荧光定量RT-PCR方法检测psiB1、psiB2、psiB3质粒脂质体转染后Bcl-2基因的表达情况结果显示:psiB1、psiB3相对于对照组无明显干扰效果,psiB2的干扰程度达66.20%.结论 针对Bcl-2基因的表达重组RNA干扰质粒psiB2(CCgggAgATAgTgATgAA)能有效沉默多药抗性Acc-3/CDDP细胞中Bcl-2基因的表达.