淋病奈瑟菌临床菌株外膜蛋白PIA基因序列分析及原核表达系统的构建

• 作者: 严杰 吴森林 周海鸥 孙爱华 宋春涵 毛亚飞
• 来源期刊: 中国病理生理杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 奈瑟球菌,淋病 基因,PIA 序列分析 原核表达
• 年，卷（期）: 2007,（11）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 2262-2264
• 页数: 3页
• 分类号: R363
• 字数: 2109字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-4718.2007.11.040

摘要

目的:分析本地区淋病奈瑟菌临床菌株外膜蛋白PIA基因核苷酸及氨基酸序列,构建PIA基因的原核表达系统.方法:采用高保真PCR扩增9株淋病奈瑟菌全长PIA基因序列,T-A克隆测序后与GenBank公布的序列进行同源性比较.构建PIA原核表达系统.采用不同浓度IPTG诱导重组目的蛋白rPIA表达,10%SDS-PAGE和Bio-Rad凝胶图像分析系统检测rPIA表达情况.采用Ni-NTA亲和层析法提纯rPIA,SDS-PAGE检测提纯效果.结果:与报道的PIA基因序列(GenBank No:L19962)比较,9株淋病奈瑟菌核苷酸和氨基酸序列相似性分别高达99.6%-100%和99.1%-100%,均属于IA6血清型.rPIA表达量可占细菌总蛋白量的50.1%,提纯后仅显示单一的目的蛋白条带.结论:IA6为本地区淋病奈瑟菌优势血清型,该基因序列相当保守.所构建的PIA基因原核表达系统能高效表达rPIA,为今后研制淋病奈瑟菌血清学检测试剂盒及疫苗研制奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	孙爱华		112	523	11.0	15.0
2	严杰	浙江大学医学院微生物和寄生虫学教研室	265	1149	14.0	20.0
3	毛亚飞	浙江大学医学院微生物和寄生虫学教研室	41	232	9.0	12.0
4	周海鸥		22	68	4.0	8.0
5	吴森林		29	89	6.0	8.0
6	宋春涵	金华职业技术学院医学院	8	9	2.0	3.0