大鼠生精细胞体外培养条件的研究

• 作者: 刘锋 檀大羡 王植柔 邓志华 邹彦
• 来源期刊: 广西医科大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 生精细胞 体外培养 大鼠
• 年，卷（期）: 2007,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 40-43
• 页数: 4页
• 分类号: Q959.8|R697.22
• 字数: 3681字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-930X.2007.01.014

摘要

目的:寻找一个最适合生精细胞体外培养的培养体系,为进一步培养人类生精细胞提供技术基础.方法:用单一酶-研磨-Percoll法制备15 d龄雄性大鼠生精细胞混悬液用于体外培养.①设计两种不同的培养条件:DMEM/F12和改良人类输卵管液(HTF)作为基础培养液,分为两组.每组根据添加不同浓度的激素分为6小组.添加的睾酮(T)和FSH浓度分别为:对照组H0(T 1 μmol/L,FSH 0 IU/L)、H1组(T 1 μmol/L,FSH 10 IU/L)、 H2组(T 1 μmol/L,FSH 25 IU/L)、H3组(T 1 μmol/L,FSH 50 IU/L)、H4组(T 1 μmol/L,FSH 100 IU/L)、H5组(T 0 μmol/L,FSH 50 IU/L). ②通过BRDU标记和流式细胞仪检测所有实验的生精细胞倍体的变化来判断其发育,进一步确认本研究使用培养条件的可靠性.结果:在生精细胞与支持细胞共培养过程中以改良人类输卵管液作为基础培养液,添加T 1 μmol/L ,FSH 50 IU/L或100 IU/L都适宜生精细胞体外培养;另通过BRDU标记及流式细胞仪检测均表明,在本研究条件下体外培养生精细胞能从初级精母细胞阶段分化到精子细胞阶段.结论:改良人类输卵管液作为基础培养液,添加浓度为50 IU/L或100 IU/L的FSH及T 1 μmol/L,最适合生精细胞的体外成熟培养.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	檀大羡		38	146	6.0	10.0
2	王植柔	广西医科大学肿瘤医院泌尿肿瘤外科	24	106	6.0	9.0
3	刘锋	广西医科大学第三附属医院生殖医疗中心	13	103	6.0	9.0
4	邹彦	广西医科大学第三附属医院生殖医疗中心	8	86	5.0	8.0
5	邓志华	广西医科大学第三附属医院生殖医疗中心	10	98	6.0	9.0