血清高密度脂蛋白的超速离心、氧化修饰及DiI标志

• 作者: 周立尧 宋旭东 陈爱华
• 来源期刊: 实用医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 脂蛋白类,HDL 超速离心法 氧化 DiI
• 年，卷（期）: 2007,（7）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 937-940
• 页数: 4页
• 分类号: R3
• 字数: 5513字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1006-5725.2007.07.002

摘要

目的:探讨一种方便快捷地从血浆中分离高密度脂蛋白(HDL)及氧化修饰、荧光标记的方法.方法:采用一次性密度梯度超速离心法,经超速离心分离后获得HDL(10℃,50 000 r/min,5 h),并用Cu2+进行氧化修饰(37℃,50 μmol/L,24 h)及DiI进行荧光标记(37℃,15 mg/mL,15 h).结果:5 h内成功分离出脂蛋白,并氧化、标记了HDL;琼脂糖凝胶电泳、Bradford蛋白质定量及MDA测定证实其为纯度和浓度较高的HDL及氧化HDL(OX-HDL);标记的HDL(DiI-HDL)结合到体外培养的ECV-304细胞,表明DiI-HDL保持了正常脂蛋白的配体功能.结论:本方法缩短了超速离心时间并降低了标记成本,效果理想,可成功应用于脂蛋白受体的研究.