小鼠IDO基因重组腺病毒载体的构建表达和鉴定

• 作者: 侯卫平 翟志芳 袁发焕 黄钢
• 来源期刊: 重庆医学
• 学科: 医学
• 关键词: IDO 腺病毒 色氨酸
• 年，卷（期）: 2007,（5）
• 所属期刊栏目: 肾内科专题
• 页码范围: 391-393
• 页数: 3页
• 分类号: R3
• 字数: 3163字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-8348.2007.05.004

摘要

目的 构建携带小鼠IDO基因的重组腺病毒载体,以期进一步进行研究其免疫学效应.方法 酶切含有小鼠全长IDOcDNA的PCOUS-2质粒,亚克隆至穿梭质粒pAdtrack-CMV上,在BJ5183细菌中和AdEasy-1进行同源重组,筛选阳性克隆,酶切、测序鉴定正确后,脂质体法转染AD-293细胞进行包装,扩增,氯化铯密度梯度离心纯化病毒并检测其滴度.RT-PCR和荧光显微镜鉴定和检测重组腺病毒转染AD-293细胞后IDO的表达,同时进行野生型腺病毒的检测.结果 经酶切及测序证实IDO基因重组腺病毒载体构建成功,RT-PCR检测到转染后AD-293细胞内IDO的表达,且无野生型腺病毒的产生.结论 成功构建了含小鼠IDO基因的重组腺病毒载体,为探讨IDO的生物学功能奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	翟志芳	第三军医大学西南医院皮肤科	97	277	8.0	12.0
2	袁发焕	第三军医大学新桥医院肾内科	134	739	12.0	20.0
3	侯卫平	第三军医大学新桥医院肾内科	16	74	5.0	8.0
4	黄钢	第三军医大学基础部医学遗传教研室	20	95	5.0	9.0