ING4基因的克隆及其诱导HeLa细胞凋亡的实验研究

• 作者: 杨吉成 王金志 盛伟华 缪竞诚
• 来源期刊: 中国病理生理杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: 基因,ING4 细胞转染 HeLa细胞
• 年，卷（期）: 2007,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 127-131
• 页数: 5页
• 分类号: Q786
• 字数: 3066字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-4718.2007.01.029

摘要

目的:分离小鼠ING4基因并构建真核表达载体pcDNA3.0-ING4,观察ING4基因转染人宫颈癌HeLa细胞后对细胞凋亡的影响.方法:应用RT-PCR技术从小鼠肝组织中扩增得到ING4cDNA.利用DNA重组技术构建真核表达载体pcDNA3.0-ING4并用双酶切、PCR、基因测序进行鉴定,然后利用阳离子脂质体lipofectamine将其转染HeLa细胞,用RT-PCR检测ING4基因的表达情况,应用荧光显微镜(Hoechst33258染色)、激光扫描共聚焦显微镜和流式细胞仪观察细胞凋亡情况.结果:RT-PCR产物为约750 bp的条带,构建的真核表达载体pcDNA3.0-ING4经双酶切、PCR鉴定均出现750 bp大小的条带,基因测序正确,Hoechst33258染色发现pcDNA3.0-ING4转染HeLa细胞的凋亡率(21.25%)明显高于对照组pcDNA3.0转染HeLa细胞的凋亡率(8.91%,P＜0.01).共聚焦显微镜也观察到了典型的细胞凋亡.细胞周期检测显示S期细胞所占百分数pcD-NA3.0-ING4转染组高于pcDNA3.0转染组.结论:分离得到了小鼠ING4基因并成功构建真核表达载体pcD-NA3.0-ING4,初步研究发现该基因转染HeLa细胞后可促使细胞凋亡.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	缪竞诚	苏州大学医学院基础医学系	95	511	13.0	17.0
2	杨吉成	苏州大学医学院基础医学系	164	943	16.0	20.0
3	盛伟华	苏州大学医学院基础医学系	129	700	15.0	18.0
4	王金志	苏州大学医学院基础医学系	20	105	6.0	9.0