乙型肝炎病毒表面抗原中蛋白去糖基化对体液免疫应答的影响

• 作者: 何晓敏 卢山 林艳 邢益平 陈仁芳 黄祖瑚
• 来源期刊: 南京医科大学学报（自然科学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 乙型肝炎 MHBs N-糖基化位点 DNA疫苗
• 年，卷（期）: 2007,（11）
• 所属期刊栏目: 基础医学研究
• 页码范围: 1209-1212
• 页数: 4页
• 分类号: R512.62
• 字数: 3096字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-4368.2007.11.003

摘要

目的:观察乙型肝炎病毒(HBV)表面抗原中蛋白(MHBs)中去糖基化对体液免疫应答的影响.方法:在MHBs核酸疫苗(pSW3891/MHBs/adr)基础上,通过PCR扩增基因修饰法,使MHBs上编码第4、59、146位氨基酸密码子基因由AAT/AAC突变为CAG,从而使AAT/AAC编码的天冬酰胺Asn(N)突变为CAG编码的谷氨酰胺Gln(Q),使得N-糖基化位点NXS、NXT突变为QXS、QXT.构建3株去糖基化核酸疫苗(dG1,去除Asn4处糖基化位点,位于preS2上;dG23,去除Asn59、Asn146处糖基化位点,均位于HBs上;dG123,去除Asn4、Asn59及Asn146位糖基化位点).脂质体法转染293T细胞,Western blot检测,观察它们在293T细胞中瞬时表达的差异;肌肉注射法免疫BALB/c小鼠,观察MHBs去糖基化对小鼠体液免疫应答的影响.结果:adr、dG23转染293T细胞后,在细胞内及上清液中均检测到HBsAg;dG1、dG123转染293T细胞后,在细胞内检测到HBsAg,但是上清液中未测到.adr、dG1及dG23免疫BALB/c小鼠后均产生抗-HBs抗体,最高滴度均达到1∶102 400;dG123几乎无抗体反应(＜1∶200).结论:Asn4去糖基化导致MHBs向细胞外的分泌障碍,但是对小鼠抗-HBs的产生无影响.Asn59、Asn146两处同时去糖基化对MHBs的分泌和小鼠抗-HBs的产生影响轻微.Asn4、Asn59及Asn 146三处同时去糖基化明显影响MHBs的分泌和小鼠抗-HBs的产生.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	何晓敏	南京医科大学第一附属医院感染病科	18	35	4.0	5.0
2	林艳	南京医科大学第一附属医院感染病科	24	103	6.0	9.0
3	黄祖瑚	南京医科大学第一附属医院感染病科	74	391	9.0	13.0
4	邢益平	南京医科大学第一附属医院感染病科	28	70	5.0	7.0
5	陈仁芳	南京医科大学第一附属医院感染病科	1	4	1.0	1.0