Klebsiella oxytoca HP1 adhE基因插入失活法构建产氢重组菌

• 作者: 徐惠娟 徐方成 朱俊波 邬小兵 龙敏南
• 来源期刊: 科学通报
• 学科: 化学
• 关键词: Klebsiella oxytoca HP1 adhE基因 发酵产氢 基因插入失活
• 年，卷（期）: 2007,（1）
• 所属期刊栏目: 论文
• 页码范围: 55-58
• 页数: 4页
• 分类号: O6
• 字数: 3412字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0023-074X.2007.01.010

摘要

乙醇是产酸克雷伯氏菌(Klebsiella oxytoca) HP1厌氧发酵产H2的主要副产物, 每生成1.0 mol的乙醇需要消耗2.0 mol NAD(P)H, 从而降低了H2的产量. 本研究以编码乙醇脱氢酶系(含乙醛脱氢酶和乙醇脱氢酶活性)的adhE基因为改造目标, 利用同源重组技术获得了以提高产氢为目标的K. oxytoca重组菌. 构建工作包括: 根据adhE基因保守序列框克隆K. oxytoca HP1 adhE基因片段, 以质粒pMHE6为模板进行链霉素抗性基因表达盒的扩增, 表达链霉素抗性的aadA基因片段和adhE基因片段分别与载体pMD18-T相连构建重组质粒, 同源整合质粒pTA-Str的构建, 以链霉素作为筛选标记筛选重组菌. 菌落PCR鉴定结果表明, aadA基因表达盒通过质粒pTA-Str的介导已定点插入K. oxytoca HP1基因组中, 成功地构建了adhE基因部分片段缺失的重组菌. 葡萄糖发酵实验结果表明, 相同发酵条件下, 重组菌比野生菌的产氢量提高了16.07%, 乙醇产量下降了70.47%. 利用基因工程技术提高产氢初步获得成功.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	邬小兵	厦门大学生命科学学院厦门大学生物能源中心	31	288	7.0	16.0
2	徐惠娟	厦门大学生命科学学院厦门大学生物能源中心	24	394	10.0	19.0
3	龙敏南	厦门大学生命科学学院厦门大学生物能源中心	64	771	14.0	26.0
4	徐方成	厦门大学化学化工学院化学工程与生物工程系	14	172	9.0	13.0
5	朱俊波	厦门大学化学化工学院化学工程与生物工程系	2	10	1.0	2.0