摘要:
背景:当各级生殖细胞DNA受到损伤而发生突变时,均可能通过受精卵遗传给后代,苯妥英钠作为传统抗癫痫药物,已被许多研究证实其对体细胞具有诱变效应,而是否对生殖细胞也具有诱变作用,并通过受精卵遗传给后代,尚需进一步研究.目的:检测苯妥英钠对人精子染色体的诱变效应.设计:以离体人精子染色体为观察对象的随机对照观察.单位:重庆医科大学附属第一医院心理卫生中心.材料:苯妥英钠购自Sigma公司,人精液标本取自近半年内未接触过理化诱变因子的健康成年男性.鼠卵取自6~8周龄的雌金黄地鼠,用含0.3%人血清白蛋白的BWW液培养基洗涤精卵和受精,在含3.5%血清白蛋白的BWW液培养基中使精子获能,受精后培养基用含10%地鼠血清的卵培养基.方法:将精子洗涤、离心、获能后,制作成5 mL精子悬液,平均分置于5支离心管中,一支加入终浓度为40 mg/L的平阳霉素作为阳性对照,一支不加任何试剂作为空白对照,其余3支分别加入终浓度为10 mg/L、20 mg/L、40 mg/L的苯妥英钠.按常规方法制作无透明带的地鼠卵后,平均分为5等份,分别与上述5组精液混合,使地鼠卵受精,并用受精的地鼠卵制备人精子染色体.采用染色体结构畸变精子率(简称畸精率)和断裂数2个指标,应用人精子染色体离体测试系统检测不同浓度苯妥英钠对人精子染色体的诱变作用,并与平阳霉素40 mg/L组和空白对照组比较.主要观察指标:各染色体精子染色体结构畸变情况,结构畸变精子率和断裂数.结果:①染色体结构畸变:不同浓度苯妥英钠组、阳性对照组和空白对照组均显示染色体断裂和单体断裂、断片、相互易位、双着丝粒体、环状染色体等多种精子染色体结构畸变,尤以苯妥英钠40 mg/L组和平阳霉素40 mg/L组更为显著.②染色体结构畸变精子率和染色体断裂数:不同浓度苯妥英钠组和平阳霉素40 mg/L组的染色体结构畸变精子率和断裂数均较空白对照组高,其中苯妥英钠40 mg/L组和平阳霉素40 mg/L组差异有显著和高度显著性(P<0.005,P<0.05~0.01).结论:苯妥英钠对人精子染色体有诱变作用.