人巨细胞病毒重组PP150的原核表达及其酶联免疫吸附试验检测

• 作者: 兰翠霞 孙树红 王清
• 来源期刊: 中国现代医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 巨细胞病毒 基因PP150 原核表达 ELISA
• 年，卷（期）: 2007,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 398-401
• 页数: 4页
• 分类号: R3
• 字数: 3296字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-8982.2007.04.004

摘要

目的 探讨人巨细胞病毒重组抗原PP150的原核表达及在酶联免疫吸附试验检测(ELISA)中的应用.方法 采用基因工程方法组建含有巨细胞病毒PP150蛋白强抗原决定簇基因的重组抗原克隆,进行诱导表达及纯化,在此基础上,以纯化的重组PP150蛋白作为包被抗原,对各种条件进行优化(如抗原的包被,作用时间及底物的选择),确定了判定标准,建立了检测HCMV IgM抗体的间接ELISA方法用此方法检测了266份血清样品,并与DSL公司ELISA试剂盒检测结果相比较.结果 重组表达质粒pMAL-P2-PP150可在E.coliDH5a中有效表达,表达产物经SDS-PAGE电泳后,凝胶成像系统分析显示相对分子质量约为Mr 64000,约占菌体蛋白的10%.Western-blot检测,阳性识别率为80.0%(12/15).用此蛋白包被ELISA板,检测正常孕妇血清,诊断符合率为98.1%,敏感性达88.2%,特异性100%.应用该方法对正常人血清样品检测HCMV-IgM,阳性率为4.1%.结论 该重组蛋白具有良好的抗原性,可望替代HCMV感染检测中的全病毒ELISA试剂盒.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王清	青岛大学医学院附属医院检验科	19	115	5.0	10.0
2	孙树红	山东青岛市中心医院核医学科	1	0	0.0	0.0