碱性成纤维细胞生长因子基因转染对鼠眼外肌成肌细胞生物学行为的影响

• 作者: 张立贵 王传富 黄晓辉
• 来源期刊: 中国组织工程研究与临床康复
• 学科: 医学
• 关键词: 眼 肌 成纤维细胞生长因子2 基因 转染
• 年，卷（期）: 2007,（33）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 6706-6711
• 页数: 6页
• 分类号: R329.28
• 字数: 3105字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1673-8225.2007.33.015

摘要

背景:实验证明外源性的碱性成纤维细胞生长因子可以增强骨骼肌成肌细胞的生长及成活,内源性碱性成纤维细胞生长因子对肌肉修复也有明显作用.但如将其基因转染到眼外肌中也有相同的效果吗?目的:探讨碱性成纤维细胞生长因子基因转染对鼠眼外肌成肌细胞生物学行为的影响.设计:单一样本观察.单位:青岛大学医学院附属医院眼科.材料:原代大鼠眼外肌成肌细胞为前期培养得到,纯度大于90%,并成功构建人PEGFP-N3-bFGF真核表达载体(另文发表).方法:实验于2005-09/2006-12在青岛大学医学院附属医院中心实验室完成.①实验干预及分组:实验分为试验组:用重组PEGFP-N3-bFGF转染的细胞;对照组1:空载PEGFP-N3转染的细胞;对照组2:培养皿中只加入F-10培养基(体积分数为0.1的胎牛血清)培养的细胞.采用脂质体转染技术,将重组PEGFP-N3-bFGF质粒转染体外培养的大鼠眼外肌成肌细胞中.③实验评估:用免疫组织化学法观察碱性成纤维细胞生长因子表达;用荧光显微镜检测转染效率;在培养的第1,3,5,7,9,11,13,15,21,28天采用ABC-ELISA法检测各组成肌细胞碱性成纤维细胞生长因子蛋白的分泌;采用四甲基偶氮唑盐法检测各组眼外肌成肌细胞增殖情况;根据已知一定浓度标准品的A值计算各组细胞肌酸激酶活性.主要观察指标:①观察碱性成纤维细胞生长因子基因转染体外培养的大鼠眼外肌成肌细胞的效率;转染后的表达情况.②转染后碱性成纤维细胞生长因子蛋白的分泌情况;对大鼠眼外肌肌原细胞生长和分化的影响.结果:①碱性成纤维细胞生长因子基因转染体外培养的大鼠眼外肌成肌细胞的转染率达(42.8±1.2)%.②免疫组织化学检测试验组呈现阳性反应.③转染细胞能够分泌碱性成纤维细胞生长因子蛋白,第5天最高达662.935 ng/L.④转染细胞增殖活性明显提高,其A值均比同一时相点的对照组明显增高(P＜0.05).⑤转染后细胞从第5天始至终,肌酸激酶值高于对照组(P＜0.01).结论:碱性成纤维细胞生长因子基因转入大鼠眼外肌的成肌细胞中,能够使大鼠眼外肌的成肌细胞分泌碱性成纤维细胞生长因子,具有促进细胞增殖,提高其成活率,促进其分化能力.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王传富	青岛大学医学院附属医院眼科	70	328	11.0	14.0
2	张立贵	青岛大学医学院附属医院眼科	7	32	3.0	5.0
3	黄晓辉	费县人民医院外科	1	3	1.0	1.0