细胞色素P450花生四烯酸表氧化酶抑制TNF-α诱导的内皮细胞凋亡

• 作者: 林立 汪道文 王炎 王燕 王红 陆再英
• 来源期刊: 中国病理生理杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 内皮源性超极化因子 内皮细胞 环氧二十碳烯酸 细胞凋亡
• 年，卷（期）: 2007,（10）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1878-1882
• 页数: 5页
• 分类号: R363
• 字数: 3848字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-4718.2007.10.002

摘要

目的:以TNF-α/act D诱导的细胞凋亡作为一种内皮细胞损伤的模型,通过转染细胞色素P450表氧化酶基因BM3·F87V、2C110R以及2J2产生内源性EDHF(EETs),探讨EDHF是否具有抗内皮细胞损伤的作用及其机制.方法:以CYP450表氧化酶BM3·F87V、2C11OR及2J2基因转染3-4代培养的牛主动脉血管内皮细胞.通过MTT方法检测细胞活性.基因转染24 h后,用TNF-α/act D作用一定时间诱导内皮细胞凋亡,以细胞形态学观察,DNA ladder分析,流式细胞仪分析(Annexin-V-FITC和propidium iodide双染法)作为检测细胞凋亡的指标.结果:MTT分析显示,转染CYP450 BM3·F87V、2C11OR以及CYP2J2基因的内皮细胞活性(分别为189.0%±18.0%,166.0%±22.6%或131.0%±22.8%)强于对照组(100.0%±21.3%).经TNF-α/act D诱导,转染pCB6的对照组内皮细胞大量脱落,未脱落细胞中许多细胞核呈碎裂颗粒状(约20.1%±0.9%);而转染CYPBM3·F87V、CYP2C110R或CYP2J2基因的内皮细胞仅见少数核呈碎颗粒状(分别约1.2%±0.2%,1.0%±0.2%或3.1%±0.2%).DNA ladder分析显示TNF-α/act D诱导后,转染表氧化酶基因的内皮细胞所形成的梯形条带弱于对照组.进一步用流式细胞仪定量检测表明,转染细胞色素表氧化酶基因CYP BM3 F87V或2C11OR内皮细胞中凋亡细胞所占比例(分别为12.35%±4.55%,10.92%±3.57%)明显低于对照组(29.57%±2.84%),而转染CYP2J2的细胞凋亡率也明显低于对照组.结论:转染CYP450基因能够增加内皮细胞活性,抑制TNF-α诱导的内皮细胞凋亡,具有内皮细胞保护效应.