人IκBαM真核表达载体的构建及其对大鼠肝移植缺血再灌注中ICAM-1的影响

• 作者: 张宏伟 潘延凤 秦涛
• 来源期刊: 中国现代医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 肝移植 缺血再灌注损伤 突变型IκBα 真核表达载体
• 年，卷（期）: 2007,（14）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1678-1682
• 页数: 5页
• 分类号: R657.3
• 字数: 3888字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-8982.2007.14.004

摘要

目的 构建人IκBαM真核表达质粒,探讨人IκBαM对大鼠肝移植缺血再灌注中ICAM-1的影响.方法 应用RT-PCR和重叠延伸pCR技术,得到点突变的人IκBαM,定向克隆至PcDNA3.0真核表达载体.将SD大鼠原位肝移植模型分4组:组Ⅰ为假手术组(行游离肝脏手术),组Ⅱ为空白对照组(行大鼠原位肝移植手术),组Ⅲ为PcDNA3.0空载体转染组(移植前两天行人PcDNA3.0转染供肝),组Ⅳ为PcDNA3.0-IκBαM转染组(移植前两天行人PcDNA3.0-IκBαM转染供肝).分别于术后2 h、12 h、24 h和3 d取材.应用免疫组化、RT-PCR测定肝组织中ICAM-1的表达,同时检测各时点肝脏酶学的变化.结果 经酶切和DNA序列测定鉴定,证实重组质粒构建正确;PcDNA3.0-IκBαM转染组与组Ⅱ、组Ⅲ相比:免疫组化示ICAM-1于移植后12 h、24 h的表达差异具有显著性;术后12 h ICAM-1mRNA的表达水平具有显著性差异;肝脏受损指标(ALT)在各时点差异具有显著性,尤其在术后12 h最为显著(P＜0.05).各移植组与Ⅰ组差异有显著性,(P＜0.05).结论 真核表达质粒PcDNA3.0-IκBαM构建成功,IκBαM通过抑制ICAM-1的表达减轻大鼠肝移植缺血再灌注损伤.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张宏伟	河南省人民医院器官移植中心	30	79	5.0	7.0
2	潘延凤	郑州大学第一附属医院感染科	34	120	6.0	9.0
3	秦涛	河南省人民医院器官移植中心	45	109	5.0	8.0