人可溶性血管内皮生长因子受体-2基因的克隆与鉴定

• 作者: 安晓静 李玉英 王宋平 钱桂生 黄桂君
• 来源期刊: 西部医学
• 学科: 生物学
• 关键词: 可溶性血管内皮生长因子受体-2 基因克隆 抗肿瘤血管生成 基因治疗
• 年，卷（期）: 2007,（6）
• 所属期刊栏目: 基础医学与实验研究
• 页码范围: 1033-1036
• 页数: 4页
• 分类号: Q78
• 字数: 4071字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1672-3511.2007.06.007

摘要

目的 获取人可溶性血管内皮生长因子受体-2(sKDR)基因,构建sKDR基因真核表达载体,为进一步研究sKDR抗肿瘤血管生成的基因治疗奠定基础.方法 提取人胎盘组织总RNA,利用RT-PCR方法扩增获得sKDR基因cDNA,将其克隆到pMD18-T载体中,测序证实后,用EcoR I和Xho I双酶切pMD18-T-sKDR重组载体,胶回收sKDR基因,再将其定向亚克隆到真核表达载体pCMV-Script中,提取质粒做双酶切和测序鉴定.结果 构建的重组sKDR基因真核表达载体pCMV-Script-sKDR分别做双酶切和测序鉴定,证实其中含有sKDR基因,测序结果经BLAST分析,与预期设计的编码区cDNA序列一致.结论 成功克隆了人sKDR基因的真核表达载体.