睾丸支持细胞对异基因T淋巴细胞的毒性作用

• 作者: 唐瑛 左娟 朱水波 杨李 殷桂林 王晓昆 王武军 邹小明 高旭辉
• 来源期刊: 中国组织工程研究与临床康复
• 学科: 医学
• 关键词: 睾丸/细胞学 塞尔托利氏细胞 免疫疗法 T淋巴细胞
• 年，卷（期）: 2007,（16）
• 所属期刊栏目: 研究与报告
• 页码范围: 3031-3034
• 页数: 4页
• 分类号: R392.45
• 字数: 5950字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1673-8225.2007.16.009

摘要

目的:分析睾丸支持细胞(塞尔托利氏细胞)对异基因T淋巴的细胞毒性作用.方法:实验于2006-01/07在解放军广州军区武汉总医院实验科完成.睾丸支持细胞取材于二三周龄SPF级Wistar雄性大鼠,由湖北省实验动物中心提供(许可证号:SCXK(鄂)-2003-005).T淋巴细胞取材于体质量为200～250 g的SPF级SD雄性大鼠脾脏,由湖北省实验动物中心提供(许可证号:SCXK(鄂)-2003-005).将Wistar大鼠睾丸支持细胞与异基因SD大鼠T淋巴细胞共同培养.按睾丸支持细胞含量将实验分6组:对照组(0个睾丸支持细胞+DMEM/F12培养基100 μL)、睾丸支持细胞1×103组(100μL)、睾丸支持细胞1×104组(100μL)、睾丸支持细胞1×105组(100μL)、睾丸支持细胞1×106组(100μL)及FasL单抗处理的睾丸支持细胞1×106组(经0.2μg抗FasL单克隆抗体封闭过的睾丸支持细胞1×106,100 μL),每组均加1×105T淋巴细胞,6复孔培养48 h,应用噻唑蓝比色法测定睾丸支持细胞对T淋巴细胞的毒性作用,用酶标仪于570 nm处测各孔吸光度(A值),细胞毒性百分比(%)=(对照组A值-试验孔A值)/对照组A值×100%.结果:睾丸支持细胞1×103组、睾丸支持细胞1×104组、睾丸支持细胞1×105组及睾丸支持细胞1×106组对T淋巴细胞的细胞毒性百分比显著高于对照组、FasL单抗处理的睾丸支持细胞1×106组(8.75%,20.37%,65.07%,62.96%;0,3.85%,P＜0.01);睾丸支持细胞1×103组～睾丸支持细胞1×105组随睾丸支持细胞数量增加,对T淋巴细胞的毒性作用也明显增加,当睾丸支持细胞数增加至1×105,杀伤作用的增加不再显著.FasL单抗处理的睾丸支持细胞1×106组与对照组相比差异无显著性意义(P＞0.05).结论:睾丸支持细胞对异基因T淋巴细胞有明显毒性作用,随着睾丸支持细胞增加,对异基因T淋巴细胞的抑制和杀伤作用也越大;但是当睾丸支持细胞达到一定数量后,其毒性作用不再增加;这种作用也可以被抗FasL单克隆抗体阻断.表明睾丸支持细胞FasL的表达是发挥免疫豁免作用的主要作用途径.