植物表达载体在三分三发根中的高效表达

• 作者: 廖志华 张明生 张磊 潘夕春 陈敏
• 来源期刊: 中草药
• 学科: 医学
• 关键词: 三分三 发根 共转化
• 年，卷（期）: 2007,（4）
• 所属期刊栏目: 药材与资源
• 页码范围: 588-591
• 页数: 4页
• 分类号: R282.1
• 字数: 3402字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0253-2670.2007.04.039

摘要

目的 建立基于发根培养的三分三Anisodus acutangulus遗传转化体系及在三分三发根中表达外源基因的方法.方法 由种子直接萌发得到无菌苗,建立了三分三的无菌苗培养系统.将植物高效表达载体pCAMBIA1304+导入经过"disarmed"改造的根癌农杆菌C58C1(携带pRiA4质粒),获得了携带外源基因表达载体的重组C58C1工程菌.取生长良好的幼嫩真叶作为外植体,在乙酰丁香酮的诱导下用重组C58C1进行感染,诱导发根.选取在无激素培养基上生长迅速,分支多的发根单克隆进行继代培养.经过3次继代培养,PCR(polymerase chain reaction,聚合酶链式反应)检测用于验证发根型质粒pRiA4和表达型质粒pCAMBIA1304+是否整合到三分三发根基因组内.结果 建立了基于发根培养的三分三遗传转化体系,发根诱导频率达到100%,PCR检测表明pRiA4和pCAMBIA1304+质粒共转化率达到32%.结论 该方法可以用于在三分三发根中高效表达外源基因,为实现基于发根的三分三产托品烷类生物碱的代谢工程奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张磊	第二军医大学药学院生药学教研室	102	809	16.0	24.0
2	张明生	贵州大学生命科学学院	74	1905	19.0	42.0
3	陈敏	西南大学生命科学学院三峡库区生态环境教育部重点实验室	71	481	13.0	19.0
4	廖志华	西南大学生命科学学院三峡库区生态环境教育部重点实验室	53	458	13.0	19.0
5	潘夕春	西南大学生命科学学院三峡库区生态环境教育部重点实验室	3	36	3.0	3.0