应用聚集培养技术进行兔骨髓间充质干细胞体外成软骨诱导培养

• 作者: 左镇华 戴刚 李忠 李起鸿 杨柳 段小军 陈光兴
• 来源期刊: 中华实验外科杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 细胞培养 间充质干细胞 软骨细胞
• 年，卷（期）: 2007,（3）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 316-318
• 页数: 3页
• 分类号: R3
• 字数: 2584字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/j.issn:1001-9030.2007.03.021

摘要

目的 观察离心管诱导培养条件下,兔骨髓间充质干细胞(MSCs)的成软骨分化,从而为应用该技术提供实验依据.方法 分离扩增兔骨髓MSCs和关节软骨细胞,采用离心管内聚集培养技术诱导培养MSCs,用含转化生长因子-β1的DMEM培养液换液,以相同培养条件下的软骨细胞为阳性对照组,以常规培养液换液的MSCs为阴性对照组;分别于培养1、2、3、4周后,收集培养物行苏木素-伊红(HE)染色、Ⅱ型胶原免疫组织化学染色和图像分析.结果 MSCs诱导培养1周后开始表达Ⅱ型胶原,随时间延长而表达增强,并逐渐产生细胞外基质,但4周内表达强度始终弱于软骨细胞组(P＜0.01).阴性对照组中部分MSCs死亡,培养物崩解.结论 采用离心管诱导培养技术可以促进MSCs向软骨细胞表型分化;该技术方法操作简单、诱导确切,适宜于鉴定干细胞的软骨分化潜能.