NucleofectorTM电转仪转染外源基因至骨髓基质细胞优化方案

• 作者: 何志英 安靓 张会迎 潘明新 王海澜 高毅
• 来源期刊: 中华实验外科杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 骨髓基质细胞 电转染 基因表达
• 年，卷（期）: 2007,（8）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 993-995
• 页数: 3页
• 分类号: R3
• 字数: 3690字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/j.issn:1001-9030.2007.08.034

摘要

目的 用NucleofectorTM电转仪介导真核表达载体pEGFP-C1及pEGFP-C1-PDX-1转染大鼠骨髓来源细胞,并对其转染条件进行优化以获得较高效率.方法 将已构建好的重组载体以NucleofectorTM电转仪转染不同方法获得的骨髓来源细胞,改变DNA的量、转染后血清浓度,在荧光显微镜下观察荧光并计算转染效率;转染后48 h进行逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测目的基因的表达情况.结果 相同条件下转染骨髓来源的神经干细胞(NSC)较转染骨髓基质细胞(MSC)可获得更高的转染效率;质粒2～10 μg获得最佳的转染效率;提高转染后培养基的血清浓度可提高转染后细胞存活率及转染效率;RT-PCR检测转染后骨髓来源nestin+细胞有PDX-1表达.结论 通过优化转染条件提高了pEGFP-C1-PDX-1转染大鼠骨髓来源nestin+细胞的效率,为成为组织工程的种子细胞提供了实验依据.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	安靓	南方医科大学组织胚胎学教研室	35	130	6.0	9.0