免疫磁珠分选骨髓衍生肝干细胞亚群c-Kit+lin-

• 作者: 周杰 廖彩仙 张守华 张春兴 朱槿 肖菊花 苏俊
• 来源期刊: 中国组织工程研究与临床康复
• 学科: 医学
• 关键词: 骨髓 肝细胞/代谢 干细胞 免疫磁珠
• 年，卷（期）: 2007,（7）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 1232-1234
• 页数: 3页
• 分类号: R3
• 字数: 4569字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1673-8225.2007.07.007

摘要

目的:利用免疫磁性细胞分选系统分离纯化骨髓衍生肝干细胞亚群c-Kit+lin-.方法:实验于2006-07/08在南方医科大学实验动物中心完成.6～8周龄的SPF级纯系BALB/C雄性小鼠10只,体质量18～20 g.收集小鼠股骨骨髓细胞,利用免疫磁性细胞分选系统,通过两步法分选纯化c-Kit+lin-:将获取的lin-细胞悬液8 ℃条件下1 500 r/min离心10 min,弃上清,接80 μL/107加入Buffer重悬细胞.按20 μL/107加生物素抗体磁珠,混匀,4 ℃冰箱孵育15 min,按1 mL/107加入Buffer洗细胞1次,8 ℃条件下1 500 r/min离心10 min,弃上清,按500 μL/108加入Buffer重悬细胞.Buffer 500 μL润MS柱,悬液过柱后,Buffer 500 μL/次洗柱3次,柱子脱离磁场,加1 mL Buffer,用配套柱塞推出柱中的c-Kit+lin-细胞,收集到c-Kit+lin-细胞,细胞计数.取2.0×106个细胞分成10等份,流式细胞仪分析c-Kit+lin-细胞纯度,计算回收率,评估纯化效率,苔盼兰染色检测纯化前后的细胞活力.计算活细胞的百分率.细胞纯度和细胞回收率的计算:细胞纯度=分离产物中的阳性细胞数/分离细胞的总细胞数×100%,细胞回收率=分离产物中的阳性细胞数/起始标本阳性细胞总数×100%.结果:10只小鼠均进入结果分析.利用免疫磁性细胞分选系统分选出的骨髓衍生肝干细胞亚群c-Kit+lin-细胞纯度和回收率分别为(77.98±2.34)%,75.40%,纯化前后细胞活力不受影响.结论:免疫磁性细胞分选系统能有效分选骨髓衍生肝干细胞亚群c-Kit+lin-,纯度和回放率高,且不影响细胞活力.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	肖菊花	南昌大学医学院第一附属医院超声科	10	28	3.0	5.0
2	周杰	南方医科大学南方医院肝胆外科	165	1069	15.0	25.0
3	张守华	南方医科大学南方医院肝胆外科	16	91	6.0	8.0
4	廖彩仙	南方医科大学南方医院肝胆外科	49	256	9.0	13.0
5	张春兴	南方医科大学南方医院肝胆外科	11	85	5.0	9.0
6	苏俊	南方医科大学南方医院肝胆外科	11	75	5.0	8.0