摘要:
目的:观察局灶性脑缺血再灌注损伤后脑神经组织存活素及生长相关蛋白43的表达情况及其与细胞凋亡和轴突再生的关系.方法:实验于2006-03/10在青岛大学医学院脑血管病研究所完成.①实验分组:将80只成年健康雄性Wistar大鼠,分为存活素组和生长相关蛋白43组,每组40只.再用随机数字表法分为正常对照组、假手术组和缺血1 h再灌注2,6,12,24,48 h,3,7,14 d组,每组4只大鼠.②实验干预:缺血再灌注各组应用线栓法制备大脑中动脉缺血再灌注模型,假手术组除不插尼龙线外,余步骤同缺血再灌注组.假手术组于术后1 d取脑组织,缺血再灌注组大鼠于再灌注2,6,12,24,48 h,3,7,14 d取脑组织检测相关指标.③实验评估:采用免疫组织化学方法检测存活素与生长相关蛋白43在神经元凋亡中的表达情况.结果:80只大鼠均进入结果分析.①细胞凋亡:缺血再灌注2~24 h组海马、皮质区及纹状体区凋亡细胞均增多,再灌注48 h,3 d组凋亡细胞呈显著增加,再灌注7 d组凋亡细胞达高峰,再灌注14 d组凋亡细胞显著降低.②存活素表达:Survivin主要分布在细胞质,呈棕黄色或棕褐色.在缺血梗死区灶周围局部较大区域内阳性细胞呈弥漫性分布,缺血中心区较多可见.再灌注2 h组海马、皮质区及纹状体区Survivin表达明显增加,6~24 h强阳性细胞表达逐渐增加,48 h达高峰,3~7 d表达恒定,14 d表达降低.③生长相关蛋白43表达:缺血再灌注2 h脑顶叶皮质区及纹状体区均有生长相关蛋白43阳性神经元表达增加,主要分布于脑梗死灶的周围区.皮质区的阳性神经元发出微丝诱导细胞沿其生长方向定向性地穿过胼胝体向海马迁徙.海马结构内生长相关蛋白43免疫反应阳性产物的密度较高,在齿状回分子层内带染色较深,增粗的强阳性反应的纤维存在于梗死灶的边缘,并向梗死灶中心区伸延.再灌注7 d达高峰,14 d达最低值.缺血再灌注48 h~7 d损伤区域神经元轴突呈出芽征,发出突触纤维.缺血再灌注2 h~14 d纹状体区均高于海马区及皮质区.结论:存活素和生长相关蛋白43在抑制神经元凋亡动态时相的表达中具有非特异性反应并促进神经元的修复和再生.