重组人脂联素真核表达载体的构建及表达

• 作者: 代芳 佘其美 杨明功 王佑民 王长江 石献忠
• 来源期刊: 中国现代医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 脂联素 真核表达 3T3-L1细胞
• 年，卷（期）: 2007,（16）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1927-1930
• 页数: 4页
• 分类号: R589.2|R394.3
• 字数: 2825字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-8982.2007.16.002

摘要

目的 为进一步研究脂联素(ADPN)的功能提供实验基础,构建含重组人脂联素(hADPN)真核表达载体的3T3-L1细胞株.方法 酶切载有人脂联素cDNA的重组克隆质粒pMD18-T和真核表达质粒pcDNA3.1+,回收目的 基因片段与线性化的真核表达质粒,经连接、转化大肠杆菌JM109,筛选阳性克隆,经酶切和核苷酸序列测定鉴定.脂质体法转染3T3-L1细胞,G418筛选阳性细胞克隆扩增,通过RT-PCR的方法逆转录合成脂联素基因片段.结果 重组真核表达质粒酶切后获得5.4 kb和800 bp两个片段,大小与理论值一致.并经核苷酸序列测定证实.RT-PCR产物经凝胶电泳后于紫外分析仪下可见在250 bp前有一清晰条带,和扩增目的 基因片段长度234 bp一致.结论 成功地构建了人重组脂联素真核表达质粒并在3T3-L1细胞中稳定表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	杨明功	安徽医科大学第一附属医院内分泌科	118	537	11.0	19.0
2	王长江	安徽医科大学第一附属医院内分泌科	135	856	14.0	21.0
3	王佑民	安徽医科大学第一附属医院内分泌科	134	693	12.0	19.0
4	代芳	安徽医科大学第一附属医院内分泌科	44	249	9.0	12.0
5	石献忠	北京大学医学部人体解剖学教研室	17	169	7.0	12.0
6	佘其美	北京市石景山医院内分泌科	7	34	3.0	5.0