HEK293细胞上表达的人类超极化激活环核苷酸门控钾通道亚型2和亚型4的电生理

• 作者: 刘元伟 李春 李继文 王世强 郝雪梅 郭继鸿
• 来源期刊: 中华医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 超极化激活环核苷酸门控钾通道,人类 全细胞记录
• 年，卷（期）: 2007,（10）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 706-709
• 页数: 4页
• 分类号: R3
• 字数: 3023字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/j:issn:0376-2491.2007.10.015

摘要

目的 将人类超极化激活环核苷酸门控钾通道亚型2(hHCN2)和亚型4(hHCN4)的基因表达于HEK293细胞系上,观察其表达的通道的电生理特点.方法 包含目的 基因hHCN2或hHCN4的cNDA亚克隆到腺病毒穿梭载体pAdTrack-CMV,穿梭载体和病毒骨架载体pAdEasy-1在大肠杆菌重组,病毒经过包装和扩增后分别转染HEK293细胞.利用全细胞膜片钳技术,记录分别转染了hHCN2和hHCN4的HEK293细胞上的超极化激活钾电流(If).结果 转染hHCN2和hHCN4的HEK293细胞上产生超极化激活的内向电流.两种通道的半数最大激活电压分别为-114.8 mV±3.3 mV和-125.9 mV±2.9 mV,反向曲线斜率分别为11.1 mV±1.2 mV和13.7 mV±1.3 mV.两者的激活动力学明显不同,刺激电压为-110 mV时,通道的激活时间常数分别为0.99 s±0.21 s和8.47 s±2.85 s.两种通道对钠离子和钾离子的相对通透性分别为0.40和0.34.两种电流均可被2mmol/L的氯化铯(CsCl)阻断.结论 目的 基因hHCN2和hHCN4在HEK293细胞上成功表达,形成的两种通道具有明显不同的激活动力学.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王世强	北京大学生命科学学院生物膜与膜生物工程国家重点实验室	24	53	5.0	6.0
2	郝雪梅	北京大学生命科学学院生物膜与膜生物工程国家重点实验室	6	123	3.0	6.0