抑制Akt活化对人结肠癌细胞c-FLIP基因表达的作用

• 作者: 于皆平 于红刚 吕农华 周晓东 徐萍 朱萱 陈幼祥 陈红霞
• 来源期刊: 世界华人消化杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 大肠癌 FLICE抑制蛋白 蛋白激酶B
• 年，卷（期）: 2007,（5）
• 所属期刊栏目: 研究快报
• 页码范围: 513-517
• 页数: 5页
• 分类号: R73
• 字数: 5164字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-3079.2007.05.017

摘要

目的:探讨结肠癌细胞中抑制蛋白激酶B(PKB/Akt)的活化对c-FLIP基因表达的调控作用.方法:取对数生长期的HT-29细胞系,分别采用10、20和40 nmol/L的Akt活化特异性抑制剂wortmannin对其进行干预,运用MTT法检测不同干预时间点的细胞增殖抑制情况.采用40 nmol/L的wortmannin干预HT-29细胞0,3,6,12,24 h后,采用Western blot检测磷酸化Akt和c*FLIP蛋白表达水平,逆转录PCR检测c-FLIP基因的转录水平.结果:三个浓度的wortmannin都对HT-29细胞的生长具有抑制作用,随着浓度、时间的递增,其抑制效应逐渐增强(P＜0.01或0.05),而对照组未见明显变化(P＞0.05).随着wortmannin的干预时间延长,磷酸化Akt蛋白的表达水平明显降低,同时c-FLIP蛋白的表达水平也随之下降,24 h后二者表达水平分别下降了82%和91%.wortmannin干预HT-29细胞3 h后,与对照组相比其c-FLIP mRNA表达水平已明显下降到40%,24 h后其表达水平下降到25%.结论:Akt活化的特异性抑制剂wortmannin可抑制体外培养的结肠癌HT-29细胞的生长,结肠癌中可能存在Akt/c-FLIP信号通路调节c-FLIP基因的表达.